果树苗木无毒苗的培育
果树苗木病毒病多由嫁接传染，一旦病毒侵入树体后，在自 然条件下永远保存在树体中，无法消除。根据果树苗木病毒病及 其类病毒病害的侵染、传播和发病特点，国内外总的防治策 略是使用无病毒或抗病毒繁殖材料，严格植物检疫，清除和 限制侵染源，防治和控制传毒虫媒。果树苗木嫁接繁殖时，如果 母本树带有病毒，就必然把病毒传染给新繁殖的苗木。目 前，在栽培的果树苗木中，有些品种已全部受病毒侵染，患有病 毒病。为了避免病毒病的危害，就必须清除病树中的病毒， 使之无病毒化，这是果树苗木病毒病防治对策的第一步。

获得无病毒母本树的方法主要有3种。第一种方法是从 果园中选择品种纯正、多年间树势健壮、品质产量都好的单 株，经病毒检验，确认无病毒后即可获得母本树；第二种方 法是人工培育无病毒母本树，包括通常采用热处理与茎尖培 养相结合和茎尖生长点培养2种方法；第三种方法是引进国 外无病毒品种。

果树苗木热处理脱毒，是生产上应用最早、最广泛的一种脱 毒手段。在果树苗木生产上，这种技术已经很成熟，已培育出许 多无病毒果树苗木单株。而茎尖组织培养需要精细的技术，与热 处理相比，难度大得多。但是对于用热处理不能或难于清除 的病毒，用茎尖培养或热处理同组织培养相结合的方法，则 可以获得无病毒的个体。此外，最近开发出的微体嫁接技 术，已应用于获得无病毒个体并引起了人们的广泛关注，其主要原理是在无菌条件下培养的砧木实生苗上，嫁接茎尖分 生组织，进而获得无病毒苗。

一、热处理脱毒

早在100多年前，苏格兰的园艺工作者就开始利用热力 治疗植物病害。1923年，采用温汤处理而脱去甘蔗的一种 病毒，成为了在病毒病害中最早脱毒成功的例子。在果树苗木方 面，于1936〜1941年间，对桃丛生病、桃黄化病、伪桃病 等，先后用热处理，主要是温汤浸渍法获得脱毒成功。其中 对桃丛生病毒，不仅用温汤而且用高温空气处理也获得成 功。同时设计出一种处理装置，探索出了热空气处理法。即 把空气温度调节在30~40^0之间，处理一定时间，以达到 脱毒的目的。自1950年对马铃薯卷叶病毒用热处理脱毒取 得成功以来，到目前为止，除黄化型病毒以外，其他多种病 毒的脱毒也相继取得成功。常绿果树苗木病毒病用热处理法脱毒 并取得成功的实例主要有柑橘速衰病毒、柑橘裂皮类病毒、 柑橘脉突病毒、柑橘碎叶病毒等。

热处理方法有2种，一是温汤浸渍和高温蒸汽处理，另 一是高温空气处理。

(一）温汤浸溃和高温蒸汽处理

通常应用的有50〜551处理10~501!^、5^：处理1〜5}1 或35cC处理30〜40h等多种温时组合。特别是热不稳定的 病毒类，有些病例在40〜45^：处理5〜301丨11或30^：处理34 即可脱毒。即树体的一部分。由于温汤处理对植物体的损害 较大，有时会导致植物组织窒息或是呈水渍状，所以在对果 树进行热处理时，通常只处理接穗；而高温蒸汽处理，则对 -42 - 植物组织损害较少，因此，现在多用高温蒸汽处理。在进行 热处理时，最重要的是要严格控制温度和处理时间。

(二）高温空气处理

处理的植物体，通常多用盆栽被病毒侵染的整株苗木， 因为热处理所用的病株，其染病组织越小脱毒效果越高。但 刚移栽的苗木根系耐热性差，一般用移栽后3个月，最好用 盆栽1年左右的苗木进行处理。泥制花盆具有良好的耐热 性，热处理中根部温度将比热处理温度下降数度，因此推荐 用泥制花盆。所以柑橘、苹果的热处理，用无病毒的实生砧 芽接带毒的病穗，芽接1周后开始进行热处理，脱毒效果良 好。目前，热处理装置有多种，小的只有11^，大的人可以 进入内部操作，可供大量试材热处理用。为调节湿度，还应 安装加湿器。尽管高温空气处理不像温汤处理那样，要求病 毒钝化温度与植物体能忍受温度之间相吻合，但温度及有关 条件也必须力求精密。

热处理温度因病毒种类而异。有的病毒在33〜34尤条 件下即可脱毒，另一些病毒必须在39〜42的条件下，才 能脱毒。生产实践中，一般多用35〜381恒温，尤以381 恒温的实例较多。如苹果在37尤土1尤恒温下热处理28〜 30d,对褪绿叶斑病毒、茎痘病毒和茎沟病毒的平均脱毒率 为 26. 5%。

许多病例证明，变温热处理较恒温热处理的脱毒效果 好。近年来，为了减少高温对植物体的损伤，有些病例改为 白天用40〜45^：处理12〜16h,夜间30〜35^：处理8 ~ 12ho

生产实践中以白天如^处理^匕，夜间30(^处理8匕的实例 居多。但也不能一概而论。如柑橘速衰病毒幼苗黄化株系， 在381恒温条件下处理8周不能脱毒，必须处理12周才能 脱毒；反之，在白天40，夜间30(^的变温条件下，处理 8周即能脱毒。柑橘碎叶病毒，38^处理16周不能脱毒， 但白天401、夜间301处理6周和白天441、夜间301处 理2周却脱毒成功。

在进行热处理脱毒时，还应控制好相对湿度和光照。通 常相对湿度应保持在70^〜80*之间。在过分干燥的条件 下，热处理的新梢生长不良。光以自然光最好，但秋冬期 间，适当补充人工光照，对新梢伸长有良好作用。而有的病 例用荧光灯和白色灯照明161即可脱毒。

为了提高植物的耐热性，延长植物在热处理中的生存时 间，热处理前往往要进行预处理。例如，在用38^：热处理 前，先在27〜351下处理1〜2周。在植物耐热性允许的范 围内，热处理的温度越高脱毒效果越好，因此，前处理的温 度也以逐渐由低到高为好。

植物体的耐热性与植物体各部分组织中的碳水化合物的 含量成正相关，因此，应在植物组织成熟的季节进行 热处理。

用热处理脱毒法培育无病毒个体时，通常是剪取苗木在 热处理中伸长出的新梢顶端嫩枝，将其嫁接到无病毒实生砧 木上。若是用新梢停止生长的苗进行热处理时，可剪取已硬 化的枝条，直接嫁接到砧木上。对于葡萄，剪取热处理中伸 长新梢或副梢的顶端部分，